هدف آزمایش: آزمایش پرولاکتین برای انداز‌گیری سطح هورمون پرولاکتین در خون انجام می‌شود .
ناشتا بودن: معمولاً لازم است بیمار حداقل 8 ساعت ناشتا باشد. مصرف آب مجاز است، اما از خوردن مواد غذایی یا نوشیدنی‌های دیگر باید پرهیز شود.
زمان نمونه‌گیری: بهتر است نمونه گیری در صبح (9-7 صبح انجام شود)، لازم است که نمونه گیری حداقل دو ساعت بعد از بیدار شدن انجام شود.
اجتناب از استرس و ورزش: استرس و ورزش شدید می‌توانند سطح پرولاکتین را بالا ببرند. بیمار باید قبل از آزمایش در وضعیت استراحت و آرامش باشد و روز قبل از آزمایش از انجام ورزش خودداری شود.
توقف داروها: برخی داروها مانند داروهای ضدافسردگی، داروهای ضددرد و داروهای ضد تهوع می‌توانند بر سطح پرولاکتین تأثیر بگذارند. بیمار باید آزمایشگاه و پزشک را از داروهایی که مصرف می‌کند مطلع سازد.
استرس و خواب: خواب کم یا شرایط استرس‌زا می‌توانند باعث افزایش سطح پرولاکتین شوند، بنابراین بیمار باید شب قبل از آزمایش به موقع بخوابد.